植物樣品準備方法詳解

植物核酸的提取和純化是分子生物學研究的基礎技術,獲得高質量的核酸是進行后期深入研究其各項性能指標及應用的前提。為使所得核酸純度高、結構完整性好,在植物樣品制備和提取過程中應根據不同的研究需要,采取不同的措施,盡量排除其他大分子成分(如多糖、蛋白質等)的干擾。本期,和大家共同分享一下植物樣品制備方面的知識,以期能夠對大家的科研有所幫助。

被子植物6大器官模式圖

1.在與研究目的不沖突的前提下,盡量選取新鮮、幼嫩、生長狀態良好的組織部位。植物組織越幼嫩新鮮所含的次生代謝產物就越少,隨著植物組織的逐漸成熟,次生代謝產物的含量會逐漸增多,而次生代謝產物的存在會影響核酸的提取效果,次生代謝產物越多,核酸提取越困難,得率也越低。

2.如果植物組織表面污漬較多,在采集之前應迅速用預冷的純凈水或75%乙醇擦拭或沖洗干凈,再用吸水紙吸干組織表面殘留液體。

3.將處理好的組織樣本混合均勻后保存于2 mL或更大體積的旋蓋凍存管中或者用準備好的錫箔紙包裹組織。

4.迅速置于液氮中冷凍1h以上,然后轉移至-80℃長期保存,干冰運輸。

植物組織制備注意事項

1.勿用TRIZol直接浸泡植物組織,也不要使用RNAlater等保護液保存植物組織,因植物組織含細胞壁及次生壁,保護液不易滲透進組織內部,達不到保護效果。

2.不建議將植物組織磨成粉末寄送,盡量送完整的組織,因粉末狀態的樣品更易降解。

3.果實類樣品核酸提取得率低,為提高核酸的產量,需要加大送樣量,一般為普通組織送樣量的3倍以上。

植物組織制備常見問題匯總

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